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            分光光度計的光譜范圍

            發布日期:2017-11-25      瀏覽次數:2462
               分光光度計的光度定義
             
              分光光度法是在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度,對該物質進行定性或定量分析。常用的波長范圍為:(1)200~380nm的紫外光區,(2)380~780nm的可見光區,(3)2.5~25μm(按波數計為4000cm&lt;-1&gt;~400cm&lt;-1&gt;)的紅外光區。所用儀器為紫外分光光度計、可見光分光光度計(或比色計)、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。為保證測量的精密度和準確度,所有儀器應按照國家計量檢定規程或本附錄規定,定期進行校正檢定。
             
              分光光度計的儀器組成
             
              分光光度計已經成為現代分子生物實驗室常規儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。
             
              儀器主要由光源、單色器、樣品室、檢測器、信號處理器和顯示與存儲系統組成。
             
              分光光度計的光譜范圍
             
              包括波長范圍為400~760 nm的可見光區和波長范圍為200~400 nm的紫外光區.不同的光源都有其*的發射光譜,因此可采用不同的發光體作為儀器的光源。
             
              鎢燈的發射光譜:鎢燈光源所發出的400~760nm波長的光譜光通過三棱鏡折射后,可得到由紅橙,黃綠,藍靛,紫組成的連續色譜;該色譜可作為可見光分光光度計的光源。
             
              氫燈(或氘燈)的發射光譜:氫燈能發出185~400 nm波長的光譜可作為紫外光光度計的光源。
             
              物質的吸收光譜
             
              如果在光源和棱鏡之間放上某種物質的溶液,此時在屏上所顯示的光譜已不再是光源的光譜,它出現了幾條暗線,即光源發射光譜中某些波長的光因溶液吸收而消失,這種被溶液吸收后的光譜稱為該溶液的吸收光譜。
             
              不同物質的吸收光譜是不同的.因此根據吸收光譜,可以鑒別溶液中所含的物質。
             
              物質的吸收光譜
             
              當光線通過某種物質的溶液時透過的光的強度減弱.因為有一部分光在溶液的表面反射或分散,一部分光被組成此溶液的物質所吸收只有一部分光可透過溶液。
             
              入射光=反射光+分散光+吸收光+透過光。
             
              如果我們用蒸餾水(或組成此溶液的溶劑)作為"空白"去校正反射,分散等因素造成的入射光的損失則:
             
              入射光=吸收光十透過光
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